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分光光度計的原理
發布日期:2023-02-15      瀏覽次數:1344
1.物質對光的選擇性吸收
當光束照射到物質上時,光與物質發生相互作用,產生反射、散射、吸收或透射。若被照射的是均勻溶液,光的散射可以忽略。
1.1溶液顏色的產生
當一束白光通過某一有色溶液時,一些波長的光被溶液吸收,另一些波長的光則透過溶液。透射光或反射光刺激人眼使人感到顏色的存在。人把自身能感覺到的光定義為可見光。在可見光區,不同波長的光呈現不同的顏色,因此溶液的顏色由透射光的波長所決定。透射光與吸收光可組成白光,故稱這兩種光互為補色光,兩種顏色互為補色。

1.2 光吸收的本質
當一束光照射到某物質或其溶液時,組成該物質的分子、原子或離子與光子發生“碰撞”,光子的能量就轉移到分子、原子或離子上,是這些粒子由最低能態(基態)躍遷到較高能態(激發態),這個作用稱為物質對光的吸收。
被激發的粒子約在10-8s后回到基態,并以熱或熒光等形式釋放出能量。分子、原子或離子具有不連續的量子化能級,僅當照射光光子的能量hυ,與被照射物質粒子的基態和激發態能量之差相當時,才能發生吸收。不同物質微粒由于結構不同而具有不同的量子化能級,其基態和激發態能量差也不相同。所以物質對光的吸收具有選擇性。

1.3 吸收曲線
吸收曲線,也稱為吸收光譜,描述了物質對不同波長的光的吸收能力。將不同波長的光透過某一固定濃度和厚度的有色溶液,測量每一波長下有色溶液對光的吸收程度(即吸光度),然后以波長為橫坐標,以吸光度為縱坐標作圖,繪制的曲線即為吸收曲線。
不同濃度的同一物質,在吸收峰附近的吸光度隨著濃度增加而增大,但最大吸收波長不變。若在最大吸收波長處測定吸光度,則靈敏度最高。因此,吸收曲線是分光光度法中選擇測定波長的重要依據。 

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